Định lượng FT3 bằng kỹ thuật miễn dịch phóng xạ

NGUYÊN LÝ

Hormone chuyển hoá T₃ lần đầu tiên được phát hiện bởi Gross và Pitt River năm 1952. Iođua được hấp thu qua thức ăn rồi được oxy hoá trong tuyến giáp và được tổng hợp vào acid amin tyrosin có trong thyroglobulin. Sự ghép cặp của các phân tử 3 monoiodo và 3,5 diiodotyrosine tạo thành T₃, trong khi 2 phân tử 3,5 diiodotyrosine tạo ra T₄, được liên kết trong chuỗi polypeptid. Các hormone được lưu trữ trong tuyến giáp ở dạng này và được phân tách protein dưới tác dụng của TSH do nhu cầu của các tế bào ngoại vi của cơ thể. Gắn với protein vận chuyển TBG, TBPA và TBA, T₃ và T₄ qua dòng máu đến cơ quan đích. Khoảng 99,7% tổng lượng T₃ được gắn với protein và bởi vậy nó được coi là kho dự trữ phần tự do có hoạt độ hormone.

Khoảng 35 μg T₃ được tạo ra trong đối tượng kho  mạnh mỗi ngày, với khoảng 25 μg được tạo thành từ T₄ do khử iod hoá ở ngoại vi. Hơn nữa hiệu lực hormone của T₃ cao hơn T₄ nhiều nên thyroxin có thể được coi là tiền hormone của T₃. Tác dụng sinh lý được qui là do hormon tự do T₃ và T₄ là phần không gắn với protein vận chuyển. Khoảng 0,3% T₃ là tồn tại dưới dạng FT₃. Chức năng chính của nó là kích thích chuyển hoá. Dư thừa hoặc thiếu hụt lượng T₃, tất cả các cơ quan có thể bị ảnh hưởng.

Nửa đời sống sinh lý của T₃ là ~ 1 ngày, T₄ là 8 ngày.

RIA-FT₃ được sử dụng để xác định nồng độ T₃ tự do bằng phương tiện là các ống nghiệm được tráng KT. Mẫu huyết thanh được ủ với KT đa dòng pha rắn. Cùng với sự cân bằng được tạo ra bởi T₃ với protein liên kết tự nhiên, còn có một cân bằng nữa với KT trong khi ủ với huyết thanh. Lượng KT sử dụng là thấp và do vậy cân bằng trên hầu như không biến đổi.

↔TBG-T₃

Ac-FT₃↔ FT₃↔ Alb-T₃

↔TBPA- T₃

Tracer FT₃ được thêm vào đệm ủ chiếm một vị trí gắn KT còn trống. Sau khi dung dịch ủ được loại bỏ, ống nghiệm được chuyển sang máy đo gamma.

Cấu trúc của tracer FT₃ đã bị biến đổi do vậy so với T₃ nó có tính phản ứng miễn dịch cao hơn với KT. Như vậy một đường cong thích đáng nhất với độ chính xác cao có thể ghi được thậm chí với một nồng độ thấp của KT pha rắn.

CHUẨN BỊ

Người thực hiện

Bác sĩ chuyên khoa Y học hạt nhân.

Kỹ thuật viên xét nghiệm RIA

Kỹ sư, kỹ thuật viên vận hành thiết bị đo mẫu

Kỹ thuật viên xét nghiệm chuyên ngành Y học hạt nhân.

Phương tiện, hoá chất

Phương tiện

Phòng làm việc thoáng mát,đủ ánh sáng,có điều hoà đảm bảo nhiệt độ thích hợp trong quá trình ủ mẫu.

2 máy đo Gamma Counter đo ¹²⁵I và xử trí mẫu tự động theo chương trình của hãng.

2 máy lắc ngang (200-350 vòng/phút,thường dùng 300 vòng/phút),2 máy trộn.

Một giá cắm bộ micropipet có số hút 50 μl và 1.000 μl,các hộp đựng đầu plastic các loại.

Giá cắm ống nghiệm .

Hoá chất: