Định lượng FT4 bằng kỹ thuật miễn dịch phóng xạ

NGUYÊN LÝ

Thyroxine có acid amin chứa iod (T₄) do tuyến giáp tiết ra là một hormone mà nồng độ của nó trong huyết thanh được điều hoà bởi cơ chế feedback âm tính liên quan tới TSH. Ở những đối tượng kho  mạnh tuyến giáp sản xuất khoảng 80 μg thyroxine mỗi ngày, trên 99,9% số đó được liên kết với protein huyết tương trong máu. Protein vận chuyển quan trọng nhất là thyroxine-binding globulin (TBG); ở điều kiện bình thường prealbumin (TBPA) và albumin (TBA) ít đóng vai trò quan trọng. Nửa đời sống sinh học của T₄ là ~ 8 ngày.

T₄ được coi là hormon và là tiền chất (hoặc dạng dự trữ) đối với T₃; chất có hoạt độ phân tử gấp 4 lần T₄ nhưng chuyển hoá nhanh hơn T₄ 10 lần. T₃ được tạo ra chủ yếu từ tổ chức ngoại vi từ T₄ bởi monodeiodase nhưng cũng được tiết ít hơn bởi tuyến giáp.

Hiệu ứng sinh học được cho là do lượng hormon tự do T₃ và T₄ không gắn với protein vận chuyển. Khoảng 0,03% lượng T₄ là dưới dạng FT₄. Chức năng chính của chúng là kích thích chuyển hoá. Sự biến đổi so với nồng độ bình thường có thể ảnh hưởng tới tất cả các cơ quan. Ở trẻ em nồng độ thấp bất thường có thể làm giảm phát triển thể chất và tinh thần.

RIA kit FT₄ được sử dụng để xác định nồng độ T₄ tự do bằng phương tiện là các ống nghiệm tráng KT và được tiến hành trong 2 giai đoạn. Trước tiên mẫu huyết thanh được ủ với KT đa dòng pha rắn và sau đó được tách chiết. Ở pha 2, nó được tách và đo sau khi ủ với FT₄ tracer. Cùng với sự cân bằng được tạo ra bởi T₄ với protein liên kết tự nhiên, còn có một cân bằng nữa với KT trong khi ủ với huyết thanh. Hình 1

↔TBG-T₄

Ac-FT₄↔ FT₄↔ Alb-T₄

↔TBPA- T₄

Sự tách chiết sau đó của mẫu huyết thanh trước khi cho thêm tracer đề phòng protein gắn tự nhiên và các biến đổi khác ảnh hưởng đến phản ứng của tracer. Cấu trúc của tracer đã bị biến đổi do vậy so với T₄ nó có tính phản ứng miễn dịch cao hơn với KT. Như vậy một đường cong thích đáng nhất với độ chính xác cao có thể ghi được thậm chí với một nồng độ thấp của KT pha rắn.

Lượng KT thấp khiến FT₄ có thể đo được mà hầu như không biến đổi về cân bằng.

CHUẨN BỊ

Người thực hiện

Bác sỹ chuyên ngành Y học hạt nhân

Kỹ thuật viên xét nghiệm RIA

Kỹ sư, kỹ thuật viên vận hành thiết bị đo mẫu

Cán bộ hóa dược phóng xạ

Phương tiện,hoá chất

Phương tiện

Máy đo Gamma Counter đo ¹²⁵I và xử trí mẫu tự động theo chương trình của hãng.

02 máy lắc ngang ( 200-350 vòng/phút ,thường dùng 300 vòng/phút ),

02 máy trộn.

01 giá cắm bộ micropipet có số hút 100 μl và 1000 μl,các hộp đựng đầu plastic các loại.

01 Giá cắm ống nghiệm .

Hoá chất: