Định lượng GH (Grown Hormon) bằng kỹ thuật miễn dịch phóng xạ

NGUYÊN LÝ

Kỹ thuật cho phép định lượng invitro GH trong huyết thanh hoặc huyết tương người bằng kỹ thuật Sandwich 1 bước. Trong phản ứng GH là kháng nguyên (KN) sẽ được gắn đặc hiệu với kháng thể đơn dòng (KTĐD)kháng GH, phức hợp KN-KT này sẽ được phát hiện bởi kháng kháng thể (KKT) đánh dấu I-125 (tracer).

Kết thúc phản ứng, lượng tracer tự do được loại bỏ bằng gạn hoặc hút và sau đó là ly tâm rửa.

Lượng KKTđánh dấu I-125  gắn một cách đặc hiệu với phức hợp GH-KTĐD được đo bằng máy đo gamma. So sánh với giá trị chuẩn sẽ tính được nồng độ của GH trong mẫu cần định lượng.

CHUẨN BỊ

Người thực hiện

Bác sỹ chuyên ngành Y học hạt nhân

Kỹ thuật viên xét nghiệm RIA

Kỹ sư, kỹ thuật viên vận hành thiết bị đo mẫu

Cán bộ hóa dược phóng xạ

Phương tiện, hoá chất

Phương tiện

Máy đo Gamma Counter đo ¹²⁵I và xử trí mẫu tự động theo chương trình.

Máy lắc ngang ( 200-350 vòng/phút, thường dùng 300 vòng/phút)

Máy trộn.

Máy ly tâm.

Bộ pipet chuyên dụng cho xét nghiệm RIA.

Một giá cắm bộ micropipet có số hút 100 μl, 200 μl, 1.000 μl và các hộp đựng đầu plastic các loại.

Giá cắm ống nghiệm.

Tủ lạnh bảo quản mẫu.

Hoá chất

Bộ kít GH; Thành phần kit gồm :

1 lọ KT kháng GH của người

1 lọ kháng kháng thể kháng GH gắn ¹²⁵I, hoạt độ < 300 kBq